Despre noi Analize Rezultate on-line Pentru femei Contact Discutii  
   

Detectia si genotiparea mutatiilor activatoare in gena BRAF

Denumirea analizei: Detectia si genotiparea mutatiilor: p.V600E (c. 1799T>A, c.1799_1800delTGinsAA), p.V600K (c.1798_1799delGTinsAA), p.V600M (c.1798G>A), p.V600A (c. 1799T>C), p.V600R (c.1798_1799delGTinsAG), p.V600D (c.1799_1800delTGinsAT), p.V600G (c.1799T>G) si toate alterarile genetice intre codonii 598-602 ale genei BRAF prin metoda de biologie moleculara
Indicatii: melanom malign, nevi, cancer pulmonar fara celule mici (NSCLC), cancer colorectal, carcinom tiroidian papilar, limfom non-Hodgkin, etc.
Durata analizei: 7-10 zile de la receptia probei in laborator
Analize asociate: K-ras, Full RAS (ALL RAS), EGFR,

Pretul analizei: 500 lei

Pagina anterioara Pe scurt Detalii Analiza Probe biologice Intrebari frecvente Discutii Bibliografie

BRAF-ul in general


          Gena BRAF codifica proto-oncogena BRAF. Proteina BRAF este o proteina tip serin/treonin kinaza, face parte din familia kinazelor Raf (BRAF: v-raf murine sarcoma viral oncogene homolog B1).
          Are un rol principal in reglarea caii de semnalizare MAPK/ERK (mitogen-activated protein kinase/extracellular signal-regulated kinase), una din caile cele mai importante, prin care se transduc signalele extracelulare spre nucleu, astfel regland proliferarea, cresterea si supravietuirea celulara. Calea de semnalizare MAPK/ERK este o retea complexa, interconectata cu alte cai de semnalizare, cu o reglare foarte precisa (fig. 1).


fig. 1, sursa imaginii: http://210.212.237.35/orcadb/biocarta_analysis.php?gene_id=4133&gene_symbol=MAP2
 

          Proteina BRAF (ca si alte componente ale acestui sistem) functioneaza ca un comutator in cascada de semnalizare RAS/RAF/MEK/ERK, activarea acestei molecule depinzand exclusiv de semnalele activatoare aferente (receptor-ligand, NRAS, KRAS activat, etc.). Activarea/dezactivarea componentelor acestei cai de semnalizare se face printr-un proces de fosforilare/defosforilare regulata si succesiva.
          BRAF-ul activat este cel mai potent activator al proteinelor MEK (MAP/ERK kinase) 1/2, care la randul lor fosforileaza ERK 1/2 (extracellular signal-regulated kinase). In urma activarii ERK1/2, ele vor activa un sir de factori de transcriptii nucleare, rezultand transcriptia unor gene specifice, initializand procese celulare specifice (proliferare, supravietuire, etc.).



BRAF-ul in cancer

          Anomaliile genetice in reglarea acestei cai de semnalizare (RAS/RAF/MEK/ERK) pot fi ereditare (Cardiofaciocutaneous syndrome, Leopard syndrome 2, Leopard syndrome 3) sau somatice (aparand numai in tesutul tumoral)

          Mutatii somatice in unele componente ale sistemului RAS/RAF/MEK/ERK se regasesc in 30% al cancerelor umane.

          Mutatiile genei BRAF sunt prezente in 7% din cancerele umane, cel mai frecvent in melanomul malignizat (30-70%), in cancerul tiroidian papilar (40-50%) si in cancerul colorectal (10%).

          Peste 90% din mutatiile detectate in gena BRAF (in tesuturile tumorale) este mutatia V600E (T1799A). Aminoacidul V600 are o importanta deosebita: face parte din segmentul activator al proteinei BRAF si in acelasi timp face parte si din suprafata de interactiune hidrofobica dintre aminoacizii G595-V600 si G463-V470. Aceasta interactiune hidrofobica prezerva centrului catalitic partial dezorgazinat si mentine molecula B-raf intr-o stare inactiva. Mutatiile codonului 600 al genei BRAF rezulta schimbarea valinei (V) intr-un alt aminoacid, de obicei in glutamina (E). In mod normal B-Raf-ul salbatic (wild type - fara mutatie) este activat numai prin fosforilare de catre Ras-ul activat, fara semnalizare (si semnal extracelular) 
Ras este inactiv (fig.- A). Mutatiile activatoare au un efect fosfomimetic, distrug suprafata de interactiune hidrofobica (si fara fosforilare), schimband centrul catalitic in organizat si accesibil, turnand B-Raful in stare permanent activata, indiferent de semnalizarile Ras (fig.- B). BRAF-ul activat prin mutatia V600E poate avea o activitate catalitica de 500 ori mai mare in comparatie cu BRAF-ul salbatic (wild type) inactiv.

Terapia tintita in melanomul malignizat (Zelboraf)

          Molecula BRAF este tinta terapiilor individualizate in melanomul malignizat (inoperabil). Pana la aparita inhibitorilor BRAF (Zelboraf (Vemurafenib)) melanoamele BRAF V600E au fost considerate mai agresive, cu o sensibilitate redusa fata de chimioterapie. Odata cu aparitia inhibitorilor BRAF, s-a constatat o imbunatatire a supravietuirii fara progresia bolii (PFS) cu 74% mai mare in comparatie cu chimoterapia conventionala la pacientii cu melanoamele BRAF V600E tratati cu astfel de inhibitori. Inhibitorii BRAF sunt eficienti numai in cazul in care BRAF-ul contine o mutatie activatoare (de obicei V600E), pacientii fara astfel de mutatii nu prezinta niciun raspuns pozitiv, din contra, terapia cu Vemurafenib poate accelera cresterea tumorilor BRAF wild type (salbatic). Zelboraful opreste activarea MEK 1/2 de catre BRAF-ul V600E, blocand eficient signalizarea prin cascada RAS/RAF/MEK/ERK, cauzand apoptoza.

Rezistenta fata de inhibitorii specifici BRAF

          In cazul aplicarii tratamentului BRAF-inhibitor exista posibilitatea sa apara rezistenta terapeutica. Exista mai multe ipoteze in legatura cu acest fenomen de rezistenta, se pare ca RAS-ul activat are un rol important in aparitia rezistentei terapeutice. RAS-ul pe langa activarea V600E BRAF poate sa transactiveze CRAF-ul, care este activatorul eficient al MEK1/2. Fenomenul de mai sus atrage atentia asupra faptului ca determinarea statusului mutatiei RAS ar putea fi importanta in aprecierea utilizarii terapiei inhibitoare BRAF.


Cantwell-Dorris ER et al. Mol Cancer Ther 2011;10:385-394
Chapman PB et al., N Engl J Med. 2011 Jun 30;364(26):2507-16


BRAF V600E - descriere: in curs de procesare...